肝吸蟲病由肝吸蟲(Clonorchis sinensis,C.s)寄生人體肝膽管所致,檢測特異性肝吸蟲抗體可作為肝吸蟲感染的輔助診斷指標。
本試劑盒采用肝吸蟲成蟲抗原作固相抗原檢測人及動物血清中的特異性肝吸蟲抗體。本試劑靈敏度高,特異性強,重復性好,操作方便快速,可分多次使用。
●試劑組成
1.預包被板 48T/96T; 7. 終止液(6號液) 1支;
2.酶結合物(1號液) 1支; 8. 陽性對照品 1支;
3.洗滌液(2號液) 1支; 9. 陰性對照品 1支;
4.底物(3號液) 1支; 10.不干膠膜 1/2片;
5.顯色劑(4號液) 1支; 11.自封袋 1個;
6.羊本稀釋液(5號液) 1支; 12.使用說明書 1份;
●操作程序
1. 加樣反應:每次試驗設陰性對照2孔、陽性及空白對照各1孔。樣本檢測孔每孔加羊本稀釋液(5號液)1滴,再分別加入待檢的血清樣本50ul,混勻;陰性、陽性對照與待檢樣本同步處理,空白對照孔僅加入羊本稀釋液(5號液)2滴。37℃避光反應30分鐘后甩去孔內液體,每孔加洗滌液(2號液)1滴,立即用蒸餾水注滿,靜置30秒后甩去,再直接用蒸餾水洗滌四次,每次均靜置30秒后甩去,最后一次甩去拍干。
2. 加酶反應:除空白對照孔外其余每孔加酶結合物(1號液)2滴,37℃避光反應30分鐘后甩去孔內液體,如上
洗滌,拍干。
3. 顯色反應:加底物(3號液)和顯色劑(4號液)各1滴,混勻,37℃下避光顯色10分鐘。加終止液(6號液)1
滴,混勻,終止反應(加終止液后藍色會變為黃色)并判讀結果。
●結果判斷
以空白對照調零,用酶標儀于450nm(630nm作參比波長)讀取吸光度(A值)。當待檢樣本孔A值大于等于陰性對照A值的2.1倍者判為陽性。如陰性對照A值低于0.05時,按0.05計算。
●注意事項
1.試劑盒于2-8℃保存,每次使用前應先平衡至室溫。
2.未使用完的板條應密封保存。
3.試劑盒中終止液具有腐蝕性,要小心使用。
4.瓶蓋每次使用后要擰緊,各瓶蓋之間不可混用。不同批號試劑盒的試劑組份不可混用。
5.試驗樣本應為無染菌、無血脂、無溶血的血清或血漿。任何樣本都應視為傳染源妥善處理。
6. 37℃孵育時,建議使用水浴箱。如無條件,可在溫箱中放置濕盒進行反應并同時用不干膠膜封蓋板孔。
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關鍵詞:對照品
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