TOP 10 Electrocompetent cell

【參數信息】

英文名稱：TOP 10 Electrocompetent cell

中文名稱：大腸桿菌TOP 10電轉感受態細胞

形態：液態懸浮細胞

純度：≥95%

儲存條件：-20℃避光干燥

生產廠商：西安強化生物科技

【簡單概述】

TOP 10 Electrocompetent cell電轉感受態細胞是一種通過特殊工藝處理大腸桿菌TOP 10 菌株制備的工程化細胞， 用于電擊轉化，不適用于熱激轉化。

其核心設計目標是實現外源DNA的導入，同時保證質粒穩定性和純度。

轉化效率：

經pUC19質粒（2686 bp, AmpR）檢測，轉化效率 >1×101? cfu/μg DNA。

【作用機制】

作用機制：電轉感受態細胞的通用與TOP 10 特異性

(一) 電轉感受態細胞的通用作用機制

電穿孔的核心是通過高壓電脈沖瞬時改變細胞膜通透性：

細胞膜穿孔：

施加高壓電場→ 細胞膜磷脂層形成納米級孔隙，外源DNA通過孔隙進入胞質。

DNA內化與修復：

DNA進入后，細胞在復蘇培養基中修復膜結構，恢復生長并表達外源基因。

細胞膜的流動性使孔隙在毫秒級內閉合，避免細胞損傷。

高效性原因：

電穿孔效率比化學法高1-2個數量級，尤其適合大片段DNA（>30 kb）或復雜結構載體的轉化。

(二) TOP 10 菌株的特異性作用機制

TOP 10 的基因型設計使其在電轉過程中具有優勢：

DNA穩定性增強：

recA1突變：阻斷同源重組途徑，降低插入片段重排概率。

endA1突變：消除核酸內切酶I的降解作用，提高質粒提取純度。

廣譜DNA兼容性：

Δ(mrr-hsdRMS-mcrBC)：解除對甲基化DNA的限制，可轉化真核來源的甲基化DNA。

mcrA缺失：允許高效轉化PCR產物的未甲基化DNA。

快速克隆表達：

生長速度介于DH5α與Mach1-T1之間，10小時內可見克隆。

阿拉伯糖代謝缺陷型（araΔ139）：適用于基于araBAD啟動子的誘導表達系統，避免誘導劑降解。

【相關試劑】

DiOC18(3)

DiOC5(3)

CDCFDA，SE

Z-YVAD-FMK

Z-DEVD-FMK

APC-Streptavidin，APC

PE-Streptavidin,PE-Cy7

Lucifer Yellow Cadaverine

6-NBDG葡萄糖攝取熒光探針

Hypoxyprobe-F6(CCI-103F)

Alexa Fluor 555-Streptavidin

Alexa Fluor 594-Streptavidin

Ethidium Monoazide Bromide

TB1 Chemically Competent Cell

BL21-AI Chemically Competent Cell

BL21-CodonPlus (DE3)-RIPL Competent Cell

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本試劑僅適用于科研實驗，敬請知悉。