試劑名稱:YOYO 1 Green Fluorescent Dye;YOYO 1 Green熒光染料
儲存:-20℃干燥避光保存至少1年,冰袋運輸。
產地:西安強化生物
CAS:143413-85-8
分子式:C49H58I4N6O2
分子量:1270.65

一、描述與基本特性:
YOYO 1 Green Fluorescent Dye 是一種綠色熒光核酸染料(YOYO 1 Green熒光染料),屬于碳菁二聚體家族。
該染料在無核酸存在時幾乎不發光,但與雙鏈 DNA 結合后會產生強烈的綠色熒光,激發波長(Ex)和發射波長(Em)分別為 491/508 nm。
其熒光量子產率為 0.52,消光系數為 98900 cm?1 M?1 。
YOYO 1 具有高親和力,能夠通過雙嵌入方式特異性結合 DNA,且對細胞膜具有不滲透性,因此只能進入死細胞或固定后的細胞,適用于死細胞檢測和細胞核染色 。
此外,它與 Cy5 和羅丹明等其他染料光譜可區分,適用于多色熒光標記實驗 。
該染料無細胞毒性,適用于長期監測細胞培養中的細胞活力 。
二、作用機制
1. 結合模式:雙嵌入(Diintercalation)
YOYO-1通過兩個YO單元分別插入DNA雙螺旋的相鄰堿基對中,形成穩定的雙嵌入結構 。這種結合具有以下特點:
高親和力:帶正電的四陽離子結構與DNA磷酸骨架的負電荷通過靜電作用增強結合。
構象限制:自由態YOYO-1分子內旋轉導致熒光淬滅;結合DNA后,分子構象固定化,減少非輻射能量耗散,從而激活熒光。
2. 熒光增強的物理化學基礎
環境敏感性:YOYO-1在疏水性環境(如DNA堿基對間)中,激發態能量通過輻射躍遷釋放,而非自由態的水相淬滅。
光譜位移:結合后吸收/發射波長從458/564 nm移至491/509 nm,表明染料嵌入后電子態改變,與DNAπ-π堆積相互作用相關。
3. 特異性與靈敏度
靶向dsDNA:優先結合雙鏈DNA(dsDNA),對單鏈DNA(ssDNA)或RNA親和力較低 。
檢測限極低:熒光增強3200倍的特性使其可檢測pg級DNA,適用于單分子成像(如STORM超分辨顯微技術)。
三、優勢與局限性
優勢:
? 高信噪比
? 光穩定性優于傳統染料
? 與Cy5/羅丹明光譜區分度高
局限性:
? 僅標記死細胞/固定細胞
? 需避光操作防淬滅
? 潛在遺傳毒性風險
以上由西安強化生物小編xxn整理
用于科研相關領域,不能用于人體實驗!
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