制藥用乳化劑蛋黃卵磷脂(供注射用）CP標準

制藥用乳化劑蛋黃卵磷脂(供注射用）CP標準

制藥用乳化劑蛋黃卵磷脂(供注射用）CP標準

蛋黃卵磷脂(供注射用）

Danhuang Luanlinzhi（Gongzhusheyong）

Egg Yolk Lecithin（For Injection）

　　[93685-90-6]
　　本品系以雞蛋黃或蛋黃粉為原料，經適當溶劑提取精制而得的磷脂混合物。按無水物計算，含氮（N）應為1.75%~1.95%，磷（P）應為3.5%~4.1%，磷脂酰膽堿不得少于68%，磷脂酰乙醇胺不得過20%，磷脂酰膽堿和磷脂酰乙醇胺的總量不得少于80%。
　　【性狀】本品為乳白色或淡黃色粉末狀或蠟狀固體；具有輕微的特臭。
　　本品在乙醇、Y醚、三L甲烷或石油醚（沸程40~60℃）中溶解，在丙酮和水中幾乎不溶。
　　酸值 本品的酸值（通則0713）應不大于20.0。
　　碘值 本品的碘值（通則0713）應為60~73。
　　過氧化值 取本品2.0g，精密稱定，置250ml碘瓶中，依法測定（通則0713），過氧化值應不大于3.0。
　　皂化值 本品的皂化值（通則0713）應為195~212。
　　【鑒別】（1）取本品0.1g，置坩堝中，加碳酸鈉-碳酸鉀（2:1）3g，混勻，微火加熱，產生的氣體能使潤濕的紅色石蕊試紙變藍。
　　（2）取鑒別（1）項下遺留的殘渣約100mg，緩緩灼燒至炭化物全部消失，放冷，加水30ml，微熱使殘渣溶解，濾過，濾液置試管中，滴加硫酸至無氣泡產生，再加硫酸4滴，加鉬酸鉀少許，加熱，應呈黃綠色。
　　（3）在磷脂酰膽堿和磷脂酰乙醇胺含量測定項下記錄的色譜圖中，供試品溶液主峰的保留時間應與對照品溶液主峰的保留時間一致。
　　【檢查】游離脂肪酸      對照品溶液的制備       稱取棕櫚酸0.512g，置50ml量瓶中，加正庚烷溶解并稀釋至刻度，搖勻，精密量取2ml，置50ml量瓶中，用正庚烷稀釋至刻度，搖勻，即得。
　　供試品溶液的制備   取本品約1g，精密稱定，置25ml量瓶中，加異丙醇溶解并稀釋至刻度，搖勻，即得。
　　測定法   精密量取供試品溶液和對照品溶液各1ml，分別置20ml具塞試管中，各加異丙醇-正庚烷-0.5mol/L硫酸溶液（40∶10∶1）混合溶液5.0ml，振搖1分鐘，放置10分鐘。供試品溶液管精密加正庚烷3ml和水3ml，對照品溶液管精密加正庚烷2ml和水4ml，密塞，上下翻轉10次，靜置至少15分鐘，使分層。分別精密量取上層液3ml，置10ml離心管中，加尼羅藍指示液（取尼羅藍0.04g，加水200ml，使溶解后，加正庚烷100ml振搖，棄去上層正庚烷。反復操作4次。取下層水溶液20ml，加無水乙醇180ml，混勻。本液置棕色瓶中，室溫下可存放1個月）lml，在通氮條件下，用*滴定液（0.01mol/L）滴定至溶液顯淡紫色。供試品溶液消耗*滴定液（0.01mol/L）的毫升數不得大于對照品溶液消耗*滴定液（0.01mol/L）的毫升數（1%）。
　　甘油三酸酯、膽固醇與棕櫚酸    取本品適量，加正己烷-異丙醇-水（40∶50∶8）混合溶液溶解并定量稀釋制成每1ml中含20mg的溶液，作為供試品溶液；另取甘油三酸酯、膽固醇與棕櫚酸對照品各適量，精密稱定，用上述混合溶液分別溶解并定量稀釋制成每1ml中各含0.6mg、0.4mg、0.2mg的甘油三酸酯、膽固醇、棕櫚酸的溶液，作為對照品溶液。照薄層色譜法（通則0502）試驗，吸取上述供試品溶液、甘油三酸酯對照品溶液與膽固醇對照品溶液各5μl，棕櫚酸對照品溶液1μl，分別點于同一硅膠G薄層板上，以正己烷-Y醚-冰醋酸（70∶30∶1）為展開劑，置內壁貼有展開劑濕潤濾紙的層析缸中，展開后，取出，晾干，噴以10%（W/V）硫酸銅稀磷酸（8%，W/V）溶液，熱風吹干，在170℃干燥10分鐘，立即檢視。供試品溶液如顯與對照品溶液相應位置的雜質斑點，其顏色與對照品溶液所顯的主斑點比較，不得更深（即甘油三酸酯不得過3%，膽固醇不得過2%，棕櫚酸不得過0.2%）。
　　有關物質 取本品約125mg，精密稱定，置25ml量瓶中，加三L甲烷-甲醇（2∶1）溶解并稀釋至刻度，搖勻，作為供試品溶液；另取溶血磷脂酰乙醇胺、鞘磷脂、溶血磷脂酰膽堿與磷脂酰肌醇對照品各適量，精密稱定，加三L甲烷-甲醇（2∶1）溶解并定量稀釋制成每1ml約含溶血磷脂酰乙醇胺10μg、20μg、40μg、60μg、100μg，約含鞘磷脂50μg、100μg、200μg、300μg、400μg，約含溶血磷脂酰膽堿50μg、100μg、200μg、300μg、400μg，含磷脂酰肌醇10μg、20μg、60μg、100μg、200μg的溶液，作為對照品溶液。照磷脂酰膽堿和磷脂酰乙醇胺含量測定項下的色譜條件，精密量取對照品溶液20μl注入液相色譜儀，以對照品溶液濃度的對數值與相應峰面積的對數值計算回歸方程。精密量取供試品溶液20μl注入液相色譜儀，用回歸方程計算有關物質的含量。含磷脂酰肌醇（PI）不得過5.0%，溶血磷脂酰乙醇胺（LPE）不得過1%，鞘磷脂（SPM）不得過3.0%，溶血磷脂酰膽堿（LPC）不得過3.5%，溶血磷脂酰乙醇胺（LPE）和溶血磷脂酰膽堿（LPC）總量不得過4.0%，上述有關物質總量不得過8.0%。
　　殘留溶劑   取本品0.2g，置20ml頂空瓶中，加水2ml，密封，作為供試品溶液；另取乙醇、丙酮、Y醚、石油醚與正己烷各適量，精密稱定，加水溶解并定量稀釋制成每1ml中分別約含200μg、200μg、200μg、50μg、27μg的溶液，作為對照品溶液。照殘留溶劑測定法（通則0861）試驗，用聚苯乙烯-二乙烯基苯為固定液（或極性相近）的毛細管柱（HP-PLOT/Q，30m×0.53mm，40/μm）為色譜柱；起始溫度為160℃，維持8分鐘，以每分鐘5℃的速率升溫至190℃，維持6分鐘；氫火焰離子化檢測器（FID）；進樣口溫度為250℃，檢測器溫度260℃。頂空瓶平衡溫度為80℃，平衡時間為45分鐘。各色譜峰的分離度應符合要求。取供試品溶液與對照品溶液，分別頂空進樣，記錄色譜圖。按外標法以峰面積計算，含乙醇、丙酮、Y醚均不得過0.2%，石油醚不得過0.05%，正己烷不得過0.02%，總殘留溶劑不得過0.5%。
　　水分   取本品，照水分測定法（通則0832第一法1）測定，含水分不得過3%。
　　蛋白質 取本品1.0g，加正己烷10ml，微溫使溶解，溶液應澄明；如有不溶物，以3000轉/分鐘的速度離心5分鐘，棄去上清液，殘留物加正己烷5ml，攪拌使溶解，同法操作2次，殘留物經減壓干燥除去正己烷后，加水lml，振搖使溶解，加縮二脲試液（取硫酸銅1.5g和酒石酸鉀鈉6.0g，加水500ml使溶解，邊攪拌邊加入10%*溶液300ml，用水稀釋至1000ml，混勻）4ml，放置30分鐘，溶液應不呈藍紫色或紅紫色。
　　重金屬 取本品2.0g，緩緩灼燒炭化，加硝酸2ml，小心加熱至干，加硫酸2ml，加熱至全炭化，在500~600℃灼燒至全灰化，放冷，依法檢查（通則0821第二法），含重金屬不得過百萬分之五。
　　砷鹽      取本品1.0g，置凱氏燒瓶中，加硫酸5ml，用小火消化使炭化（必要時可添加硫酸，總量不超過10ml），小心逐滴加入濃*溶液，俟反應停止，繼續加熱，并滴加濃*溶液至溶液無色，冷卻，加水10ml，蒸發至濃煙發生使除盡*，加鹽酸5ml與水適量，依法檢查（通則0822第一法），應符合規定（0.0002%）。
　　細菌內毒素        取本品，以無水乙醇充分溶解，進一步使用細菌內毒素檢查用水稀釋至實驗所需濃度（該溶液中乙醇濃度應小于20%），依法檢查（通則1143），每1g中含內毒素的量應小于2.0EU。
　　微生物限度       取本品，依法檢查（通則1105與通則1106），每1g供試品中需氧菌總數不得過102cfu，霉菌和酵母菌總數不得過102cfu，不得檢出大腸埃希菌；每10g供試品中不得檢出沙門菌。
　　【含量測定】氮 取本品約0.1g，依法測定（通則0704）計算，即得。
　　磷對照品溶液的制備 取105℃干燥至恒重的磷酸二氫鉀約0.13g，精密稱定，置100ml量瓶中，加水溶解并稀釋至刻度，精密量取10ml，置100ml量瓶中，用水稀釋至刻度，搖勻，每1ml中含磷（P）約為30μg。
　　供試品溶液的制備 取本品約0.1g，精密稱定，置坩堝中，加三L甲烷2ml溶解，加氧化鋅2g，蒸去三L甲烷，緩緩熾灼使樣品炭化，然后在600℃熾灼1小時，放冷，加鹽酸溶液（1→2）10ml，煮沸5分鐘使殘渣溶解，轉移至100ml量瓶中，用水稀釋至刻度，搖勻。
　　測定法       精密量取對照品溶液0ml、2ml、4ml、6ml、10ml，分別置25ml量瓶中，依次分別加水10ml，鉬酸銨硫酸溶液（取鉬酸銨5g，加0.5mol/L硫酸溶液100ml）1ml，對苯二酚硫酸溶液（取對苯二酚0.5g，加0.25mol/L硫酸溶液100ml，臨用前配制）lml和50%醋酸鈉溶液3ml，并用水稀釋至刻度，搖勻，放置5分鐘。照紫外-可見分光光度法（通則0401），以第一瓶為空白，在720nm的波長處測定吸光度，以測得吸光度與其對應的濃度計算回歸方程。另精密量取供試品溶液4ml，置25ml量瓶中，照標準曲線制備項下自“依次分別加水10ml”起同法操作，測得吸光度，由回歸方程計算含磷（P）量，即得。
　　磷脂酰膽堿和磷脂酰乙醇胺 照高效液相色譜法（通則0512）測定。
　　色譜條件與系統適用性試驗            用硅膠為填充劑（色譜柱Allt1ma Sillica，250mm X 4.6mm，5μm或效能相當的色譜柱）；以甲醇-水-冰醋酸-三乙胺（85∶15∶0.45∶0.05）為流動相A，以正己烷-異丙醇-流動相A（20∶48∶32）為流動相B；按下表進行梯度洗脫；柱溫為40℃，用蒸發光散射檢測器檢測（參考條件：漂移管溫度為72℃；載氣流量為每分鐘2.0L）。
　　　　取磷脂酰乙醇胺、磷脂酰肌醇、溶血磷脂酰乙醇胺、蛋黃磷脂酰膽堿、鞘磷脂、溶血磷脂酰膽堿對照品各適量，用三L甲烷-甲醇（2∶1）溶解并稀釋制成每1ml中含上述對照品分別為50μg、100μg、100μg、200μg、200μg、200μg的混合溶液，取20μl注入液相色譜儀，各成分按上述順序依次洗脫，各成分分離度應符合要求，理論板數按蛋黃磷脂酰膽堿峰與磷脂酰乙醇胺峰計算均不低于1500。
　　測定法 取蛋黃磷脂酰膽堿和磷脂酰乙醇胺對照品各適量，精密稱定，加三L甲烷-甲醇（2∶1）溶解并定量稀釋制成含蛋黃磷脂酰膽堿和磷脂酰乙醇胺6個不同濃度溶液作為對照品溶液，對照品溶液中蛋黃磷脂酰膽堿和磷脂酰乙醇胺的濃度范圍應涵蓋供試品溶液中蛋黃磷脂酰膽堿和磷脂酰乙醇胺含量的60%~140%。精密量取上述對照品溶液各20μl注入液相色譜儀中，以對照品溶液濃度的對數值與相應峰面積的對數值計算回歸方程；另精密稱取本品約15mg，置50ml量瓶中，加三L甲烷-甲醇（2∶1）溶解并稀釋至刻度，搖勻，作為供試品溶液。精密量取20μl注入液相色譜儀中，記錄色譜圖。用回歸方程計算磷脂酰膽堿、磷脂酰乙醇胺的含量，即得。
　　【類別】藥用輔料，乳化劑，增溶劑、脂質體膜材等。
　　【貯藏】密封、避光，低溫（-18℃以下）保存。