美國NOVABIOS恙蟲病IgG抗體 ELISA檢測試劑
美國NOVABIOS恙蟲病IgG抗體 ELISA檢測試劑
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【預期用途】
恙蟲病IgG ELISA試劑盒可用來檢測人是否感染恙蟲病東方螺旋體（OT），它是檢測血漿或血清中抗恙蟲病東方螺旋體源性重組抗原的IgG抗體的一種ELISA檢測系統。此實驗可輔助診斷人是否感染了恙蟲病東方螺旋體，此試劑盒不能用于篩查血液或血液成分，僅供體外診斷用。
【檢測原理】
恙蟲病IgG ELISA試劑盒是一種定量檢測人血清和血漿中抗OT IgG抗體的酶免試劑。包被板的微孔中包被了重組抗原混合物（如下）。在檢測的時候，血清應當用Inbios的樣品稀釋液稀釋后再加入微孔中，具體請見如下的“血清應用范例”。在溫育并洗板后，在微孔中加入HRP標記的IgG酶聯物。溫育并洗板，再向微孔中加入TMB底物液并溫育。后再加入酸性終止液，并在450nm檢測底物反應的程度。所檢測到的OD值與樣品中IgG抗體的濃度成正比。陰性質控和弱陽性質控以內在質控形式提供，其目的是為了監測試劑盒成分的完整性。如果樣品與抗原間發生了反應，則樣品應當被認為是陽性的。
【檢測步驟】
將所有的試劑成分和樣品都平衡至室溫。實驗前反復倒置以便試劑和樣品混合均勻。陽性質控、陰性質控和未知血清都必須做雙份檢測。
1） 確定好所需檢驗的血清樣品量。
2） 按照如下的“血清應用范例”組織血清樣品（僅供參考，用戶也可以自己設置相應的位置），用戶可以雜試管或ELISA塑料板內稀釋樣品。
3） 用樣品稀釋液將樣品稀釋50倍（您可以在8ul的血清中加入392ul樣品稀釋液），混合。注意：血清和質控品不能低于4ul。
4） 用移液器將稀釋好的血清和質控各50ul加入到相應的微孔中。
5） 用封板膠僅在開放的微孔表面封板，所有板條的底部是沒有覆蓋的。
注意：這樣是為了保證溫度的分布在每個孔的底部和血緣相等地散播。一旦頂部密封阻礙了蒸發，任何多余的封板膠必需被剪掉。
6） 37℃下保濕溫育板條30分鐘，在溫育器的底部放置水浴箱可達濕潤的作用。注意：不要將微孔板疊放，必須單獨地分層平輔。這對于溫度的平等分布非常重要。不要使用CO2或任何氣體，不要讓板條接觸任何濕潤的物質，如濕紙巾等。
7） 溫育后，用洗板機洗板6次，每次每孔300ul。
8） 在每一微孔中加入50ul即用型的酶聯物。
9） 用封板膠僅在開放的微孔表面封板，所有板條的底部是沒有覆蓋的。（同步驟5）
10） 37℃下保濕溫育板條30分鐘。（同步驟6）
11） 溫育后，用洗板機洗板6次，每次每孔300ul。
12） 用多道移液器在每一微孔中加入150ul Enwash溶液。
13） 室溫溫育5分鐘。
14） 溫育后，用洗板機洗板6次，每次每孔300ul。
15） 用多道移液器在每一微孔中加入75ul TMB底物液。
16） 室溫避光溫育10min。
17） 溫育后，用多道移液器在每一微孔中加入50ul終止液，室溫溫育1min。
18） 溫育后，450nm處測 OD值。
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