斑馬魚模型評價過敏反應【評價原理】
過敏原/致敏因子誘導組織學上肥大細胞脫顆粒，釋放活性介質如組胺、5-HT，前列腺素D、白三烯、血小板活化因子等，表現為平滑肌收縮，毛細血管擴大和通透性增強，腺體分泌物增多等，誘發多種過敏癥狀。 類胰蛋白酶是肥大細胞內預先合成的中性蛋白酶，是臨床上檢驗人體是否過敏的重要指標。斑馬魚產生過敏反應時，亦誘導肥大細胞分泌類胰蛋白酶。C48/80作為肥大細胞活化劑，可以誘導組織學上肥大細胞脫顆粒，釋放類胰蛋白酶。
我們檢測過敏有兩種方法。1. 類胰蛋白酶的含量：用酶標儀檢測類胰蛋白酶的含量。2. 肥大細胞數量：制作病理切片，經過過碘酸雪夫染色，肥大細胞呈藍色，肥大細胞釋放的組胺和白三烯等物質呈紅色。
斑馬魚模型評價過敏反應【實驗方案】
我們將受測試斑馬魚分成四組，分別是正常對照組和滴注致敏劑低、中、高劑量組。其中正常對照組未滴注C48/80，滴注致敏劑組均滴注C48/80低、中、高劑量（C48/80通過溶解到養魚用水中的方式攝入到斑馬魚體內）。
滴注C48/80一段時間后，利用酶標儀檢測類胰蛋白酶含量（吸光度值），同時制作病理切片進行過碘酸雪夫染色。
【結果展示】
圖1. 斑馬魚類胰蛋白酶含量（吸光度值）
與正常對照組比較，*p < 0.05，***p < 0.001
可以看到，滴注中、高濃度致敏劑組類胰蛋白酶含量與正常對照組比較明顯升高。
圖2. 斑馬魚體內肥大細胞染色典型圖
箭頭指示為肥大細胞
從病理切片中也能看出來，滴注致敏劑組斑馬魚的肥大細胞與正常對照組相比數量明顯上升。
【評價結論】
1.經過每組30尾斑馬魚的對比實驗，滴注致敏劑組斑馬魚類胰蛋白酶含量和肥大細胞數量與正常對照組相比數量明顯上升。
2.本實驗證實了C48/80具有明顯的致敏作用。
采購中心
