兔尿游離皮質(zhì)醇(UFC) ELISA 試劑盒
操作步驟
1. 從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條，剩余板條用自封袋密封放回4℃。
2. 設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔，標(biāo)準(zhǔn)品孔各加不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品50μL；
3. 樣本孔先加待測(cè)樣本10μL，再加樣本稀釋液40μL；空白孔不加。
4. 除空白孔外，標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶（HRP）標(biāo)記的檢測(cè)抗體100μL，用封板膜封住反應(yīng)孔，37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。
5. 棄去液體，吸水紙上拍干，每孔加滿洗滌液，靜置1min，甩去洗滌液，吸水紙上拍干，如此重復(fù)洗板5次（也可用洗板機(jī)洗板）。
6. 每孔加入底物A、B各50μL，37℃避光孵育15min。
7. 每孔加入終止液50μL，15min內(nèi)，在450nm波長處測(cè)定各孔的OD值。
兔尿游離皮質(zhì)醇(UFC) ELISA 試劑盒
Elisa試驗(yàn)操作中可能影響結(jié)果的原因及其相應(yīng)的解決辦法
1 選擇試劑 選擇質(zhì)量優(yōu)良的檢測(cè)試劑，嚴(yán)格按照試劑說明書進(jìn)行操作，操作前將試劑在室溫下平衡至少30分鐘。
2 加樣 可能原因： 1）血清或血漿標(biāo)本分離不好即進(jìn)行加樣； 2）手工操作中，加樣板過多造成加樣后放入孵箱前等待時(shí)間過長(特別是室內(nèi)溫度較高時(shí))； 3）加完標(biāo)本再加酶試劑時(shí)酶濺出孔外。解決辦法： 1） 標(biāo)本為血清：將血液先自然存放1-2小時(shí)后，再用3000rmp離心15分鐘；標(biāo)本為血漿：必須使用含抗凝劑的血液標(biāo)本收集管，采血后必須立即顛倒采血管混合5-10次，放置一段時(shí)間后，3000rpm離心15分鐘；若在幾天內(nèi)檢測(cè)，可放在2-8℃冰箱中，若要貯存，則置于-20℃的低溫冰箱內(nèi)。 2) 加樣后及時(shí)放入孵箱。 3) 加酶試劑后用吸水紙?jiān)诿笜?biāo)板表面輕拭吸干。 4) 如果采用AT或其他全自動(dòng)加樣，選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。 5) 標(biāo)本較多時(shí)，請(qǐng)分批操作。
3 孵育 可能原因： 1) 孵育時(shí)未貼封片或加蓋，使標(biāo)本或稀釋液蒸發(fā)，吸附于孔壁，難于清洗*； 2) 孵育時(shí)間人為延長，導(dǎo)致非特異性結(jié)合緊附于反應(yīng)孔周圍，難以清洗*。解決辦法： 1) 貼封片或加蓋； 2) 按說明步驟嚴(yán)格控制操作時(shí)間。
4 洗板 可能原因： 1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。 2) 采用半自動(dòng)洗板機(jī)洗板時(shí)，洗液量不足，導(dǎo)致洗板不*；洗板針堵塞，抽吸不*；洗板不暢，導(dǎo)致洗板效果差。 3) 反應(yīng)板過多造成洗板等待時(shí)間長。 解決辦法： 1) 保證洗液注滿各孔，洗板針暢通，洗完板后在吸水紙（選擇干凈、無或少塵的吸水材料）上輕輕拍干； 2) 合理安排，或多用幾臺(tái)洗板機(jī)。
5 顯色 可能原因： 1) 顯色劑配制后放置時(shí)間過長或使用過期顯色劑； 2) 加顯色劑時(shí)濺出孔外造成液體回流。解決辦法： 1) 顯色劑盡量在臨用前配制，堅(jiān)持不用過期顯色劑，肉眼可見淺藍(lán)色的TMB顯色劑不用； 2) 加樣時(shí)保持顯色劑不外流； 3) A、B液應(yīng)避免接觸金屬器械。
6 終止 可能原因如加終止液時(shí)產(chǎn)生較多氣泡，導(dǎo)致假陽性增加。所以在加終止液時(shí)應(yīng)避免產(chǎn)生氣泡。
7 讀板 如讀板時(shí)板底不清潔等。應(yīng)保證酶標(biāo)板清潔。
在整個(gè)操作過程中保證酶標(biāo)板不接觸次氯酸；盡可能實(shí)現(xiàn)ELISA檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)自動(dòng)化，有效提高檢測(cè)質(zhì)量。在實(shí)際操作中，除了選擇優(yōu)良試劑外，必須嚴(yán)格按照操作步驟進(jìn)行操作，同時(shí)做好室內(nèi)質(zhì)控、室間質(zhì)評(píng)，以嚴(yán)謹(jǐn)?shù)墓ぷ髯黠L(fēng)檢測(cè)每一份標(biāo)本，才能保證檢測(cè)質(zhì)量。
ELISA試驗(yàn)以靈敏度較高、特異性較好的特點(diǎn)得到了廣泛的應(yīng)用，但操作中的各個(gè)環(huán)節(jié)對(duì)試驗(yàn)的檢測(cè)效果影響較大，如不注意，有可能導(dǎo)致顯色不全、花板等結(jié)果。我公司將操作中各個(gè)環(huán)節(jié)常出現(xiàn)問題的原因及解決辦法總結(jié)于下，以期提高試驗(yàn)質(zhì)量。
兔尿游離皮質(zhì)醇(UFC) ELISA 試劑盒
篤瑪生物關(guān)于試劑盒的優(yōu)勢(shì)：
1.高效，靈敏，特異的抗體
2.穩(wěn)定的重復(fù)性和可靠性
3.吸附性能好，空白值低，孔底透明度高和固相載體
4.適用血清，血漿，組織勻漿液，細(xì)胞培養(yǎng)上清液，尿液等多種標(biāo)本類型
~上海篤瑪生物科技有限公司是一家從事生物學(xué)試劑及試劑盒的高科技生物企業(yè)。
總部位于上海，并在全國設(shè)有經(jīng)銷或代理機(jī)構(gòu)。產(chǎn)品因可靠而穩(wěn)定的質(zhì)量和較為*的售后服務(wù)確立了“篤瑪生物”良好的品牌形象。公司秉承“以客戶為中心、以產(chǎn)品為保障、以誠信為基礎(chǔ)、以創(chuàng)新為宗旨”的發(fā)展理念，擁有專業(yè)的研發(fā)和質(zhì)量檢測(cè)團(tuán)隊(duì)以及*的倉儲(chǔ)和物流系統(tǒng)。“篤瑪生物”已經(jīng)得到全國科研工作者的認(rèn)可，成為廣大經(jīng)銷商推崇的。
公司擁有一批專業(yè)的研發(fā)人員，我們專注于生物產(chǎn)品的不斷*和創(chuàng)新。產(chǎn)品覆蓋面廣，品質(zhì)可靠。先后開發(fā)了涵蓋分子生物學(xué)、細(xì)胞生物學(xué)、免疫學(xué)、生物醫(yī)學(xué)等領(lǐng)域的多種試劑及試劑盒。同時(shí)，提供各種常規(guī)生化試劑，庫存常備產(chǎn)品多達(dá)10000多種，可隨時(shí)為廣大科研工作者提供各類專業(yè)試劑。在質(zhì)量方面，謹(jǐn)記公司信念：質(zhì)量高于一切。所有研發(fā)的產(chǎn)品都設(shè)有嚴(yán)謹(jǐn)?shù)纳a(chǎn)流程，科學(xué)的質(zhì)量檢測(cè)方法和成熟的質(zhì)量檢測(cè)程序，我們恪守對(duì)每一位用戶的承諾：用專業(yè)的態(tài)度做專業(yè)的品牌。同時(shí)，公司組建了一支專業(yè)的技術(shù)服務(wù)隊(duì)伍，能夠?yàn)榭蒲泄ぷ髡咛峁I(yè)的技術(shù)服務(wù)。每一位購買篤瑪生物產(chǎn)品的用戶都能夠得到專業(yè)的咨詢和*的售后服務(wù)。
上海篤瑪生物科技有限公司堅(jiān)持與接軌，注重和*企業(yè)的合作與交流，目前已經(jīng)和Sigma、Life、Amresco、abcam、CST、santa、Corning、R＆D、Millipore、AAT、Applichem、以及Dragon等企業(yè)結(jié)成緊密的合作關(guān)系，并提供產(chǎn)品代理、市場咨詢等多項(xiàng)服務(wù)。公司將一如既往與世界更多合作，不斷為廣大生物科研工作者提供更優(yōu)質(zhì)的產(chǎn)品和服務(wù)。
兔尿游離皮質(zhì)醇（UFC） ELISA 試劑盒 說明書
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