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測定化妝品中二十一種磺胺的液相色譜儀

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產品簡介

測定化妝品中二十一種磺胺的液相色譜儀

詳細介紹

測定化妝品中二十一種磺胺的液相色譜儀

二十一種磺胺物質是我國《化妝品衛生規范》貴的的禁用物質，部分作為化妝品生產原料即添加組分添加到化妝品中。如果技術上無法避免禁用物質作為雜志帶入化妝品時，測化妝品成品應符合《化妝品衛生規范》對化妝品的一般要求，即在正常及合理的可預見的使用條件下，不得對人體健康產生危害。

目前我國尚未規定這些物質的值，本標準的定義，僅對化妝品中測定這些物質提供檢測方法。

化妝品中二十一種磺胺的測定高效液相色譜法

1 范圍

本標準規定了化妝品中二十一種磺胺的測定高效液相色譜法。

本標準適用于化妝品中二十一種磺胺的測定。

2 規范性科研文件

下列文件中的條款通過本標準的引用貳成為本標準的條款。

GB/T 6682 分析實驗室用水規格和實驗方法

3 原理

試樣經溶劑提取，離心過濾后，用高效液相色譜測定，外標法定量，液相色譜-質譜確認。

4 試劑和材料

除非另有說明，所有試劑均分析純，水為GB/T 6682貴的的一級水。

4.1 甲醇：色譜純。

4.2 *：色譜純。

4.3 *溶液（0.1mol/L）：準確稱取4g*于1L容量瓶中，用水溶解并定容至刻度，混勻后備用。

4.4 甲酸溶液（0.1%）：準確量取1ml甲酸于1L容量瓶中，用水定容至刻度，混勻后備用。

4.5 甲醇水溶液：準確量取50ml甲醇和50ml水，混勻后備用。

4.6 磺胺胍、磺胺、、、、、、磺胺甲基吡啶、磺胺二甲噁唑、、磺胺間二甲嘧啶、磺胺唑噁啉、磺胺硝苯、磺胺甲噻二唑、、琥珀酰、、磺胺甲基異噁唑、、磺胺領苯二甲氧嘧啶、磺胺二甲異噁唑標準品：純度大于97%。

4.7 二十一中磺胺標準儲備液：準確稱取每種磺胺標準物質（4.6）各100mg，分別置于100ml棕色容量瓶中，用甲醇水溶液（4.5）溶解并定容至刻度，搖勻，配置成濃度分別為1000ug/mL的標準儲備液，于4℃避光保存，可使用三個月

注磺胺噁唑標準儲備液配置時，可加入數滴*溶液（4.3）輔助溶解。

4.8 二十一種磺胺的混合標準儲備液：分別準確移取二十一種磺胺標準儲備液歌4ml余100ml棕色容量瓶中，用甲醇水溶液（4.5）定容至刻度，該溶液中二十一中磺胺的濃度均為40ug/mL。

5 儀器和設備

5.1 高效液相色譜儀（HPLC STI500二元梯度）：配有紫外檢測器或二極管陣列檢測器。

5.2 液相色譜-質譜/質譜（LC-MS/MS）儀：配有電噴霧離子源（ESI）.

5.3 分析天平：感量為0.0001g和0.001g。

5.4 離心機：轉速不低于5000r/min。

5.5 超聲波水浴。

5.6 具塞比色管：10ml。

5.7 具塞塑料離心管：10ml。

5.8 微孔濾膜：0.45um，有機相。

6 分析步驟

6.1 樣品處理

6.1.1 膏霜、乳業、水劑、散粉、香波類樣品

稱取1g（精確至0.001g）試樣于10Ml具塞比色管中，加入5ml甲醇，再加水至10ml，超聲提取20min。取部分溶液轉移至10Ml具塞比色管中，以不低于5000r/min離心15min，上清液經0.45um微孔濾膜過濾，過濾液作為待測樣液。

注：如離心難以得上清液可加適量氯化鈉破乳。

6.1.2 唇膏類樣品

稱取1g（精確至0.001g）試樣于10Ml具塞比色管中，加入2ml*，超聲提取10Min，再加水至10Ml，超聲提取10min。取部分溶液轉移至10Ml具塞比色管中，以不低于5000r/min離心15min，上清液經0.45um微孔濾膜過濾，過濾液作為待測樣液。

6.2 測定條件

高效液相色譜測定條件如下：

A，色譜柱：Vertex C18，5um,250mm×4.6mm（內徑）。

B，流動相見表1.

C，流速：1.0ml/min。

D，柱溫：32℃。

E，波長：268nm。

F，進樣量：20ul。

表1流動相

步驟	時間/min	甲醇溶液（0.1%）/%	甲醇/%
0	0.00	92	8
1	7.00	84	16
2	13.00	78	22
3	18.00	75	25
4	27.00	75	25
5	29.00	45	55
6	40.00	5	95
7	42.00	92	8

6.3 標準曲線的繪制

用甲醇水溶液（4.5）將二十一種磺胺混合標準儲備液逐級稀釋得到的濃度為0.1ug/ml、0.5ug/ml、1ug/ml、5ug/ml、10ug/ml、20ug/ml的混合標準工作液，按6.2的測定條件濃度由低到高進樣測定，以峰面積-濃度作圖，得到標準曲線回歸方程。

二十一種磺胺標準品色譜圖見A.1

6.4 測定

按6.2的測定條件對待測樣液進行測定，用外標法定量。待測樣液中磺胺的響應值應在標準曲線的線性范圍內，超過線性范圍測應稀釋后再進樣分析。必要時，陽性樣品需要用液相色譜-質譜確認試驗（參見附錄B）

6.5 空白試驗

除不稱取樣品外，均按上述測定條件和步驟進行。

7結果計算

結果按式（1）計算，計算結果保留2為小數（計算結果應扣除空白值）：

Wi=1000×Ci×V/m…..(1)

Wi—試樣中被測磺胺的含量，單位為毫克每千克（mg/kg）

Ci—從標準工作曲線上查出的樣液中被測磺胺的濃度，單位為ug/ml

V—樣液最終定容體積，單位L

m—試樣的質量，單位g

8 檢出限和定量限

本標準的檢出限和定量：磺胺胍、磺胺、、、、、、磺胺甲基吡啶、磺胺二甲噁唑、、磺胺間二甲嘧啶、磺胺唑噁啉、磺胺硝苯的檢出限為0.2mg/kg，定量限為0.6mg/kg；磺胺甲噻二唑、、琥珀酰、、磺胺甲基異噁唑、、磺胺領苯二甲氧嘧啶、磺胺二甲異噁唑的檢出限為0.4mg/kg，定量限為1.2mg/kg。

9 回收率

在天津濃度為0.2mg/kg-40mg/kg濃度范圍內，回收率在85%-110%之間，相對標準偏差小于10%。

10 允許差

在重復性條件下獲得的兩次獨立測定結果的差值不應超過算術平均值的10%。

附錄B，詳細請電話咨詢：

關鍵詞：二十一種磺胺，高效液相色譜法，化妝品新規，GB/T 24800.6-2009

關鍵詞：液相色譜標準品標準物質離心機離心管

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