醫藥工業潔凈室（區）浮游菌的測試方法

測試儀器、輔助設備和培養基

選擇合適的浮游菌采樣器，包括采用無油的抽氣泵，較低的氣流流速和較大的采樣流量,以保證培養基表面的水分不被吹干。

本測試需要具備儀器、輔助設備和培養基如下:

a.浮游菌采樣器

b.培養皿

c.培養基

d.恒溫培養箱

e.高壓蒸汽滅菌器。

測試要點

1.必須按照測試儀器的檢定周期，定期對儀器作檢定。使用校驗合格,且在使用有效期內的儀器。

2.測試儀器在未進入被測區域時，若必需則先清潔表面,或在相應的潔凈室內準備和存放(用保護罩或其他適當地外罩保護儀器)。

3.在100級潔凈室內用紙時,上面應蒙上一張透明不沾塵的覆蓋物，在100級潔凈室內不能用鉛筆和橡皮。

4.使用測試儀器時，應嚴格按照儀器說明書操作。

5.儀器開機，預熱至穩定后，方可按儀器說明書的規定對儀器進行校正，同時檢查采樣流量，并根據采樣量設定采樣時間。

6.采樣口必須用便于消毒及化學性能穩定的材料制造。

7.采樣管嚴禁滲漏，內壁應光滑。

8.采樣管的長度應根據測點的高度定，盡量減少彎曲。

測試步驟

1.測試前，儀器、培養皿表面必須嚴格消毒。

（1）采樣器進入被測房間前先用消毒房間的消毒劑滅菌，用于100級潔凈室的采樣器宜預先放在被測房間內。

（2）用消毒劑擦凈培養皿的外表面。

（3）采樣前，先用消毒劑清洗釆樣器的頂蓋、轉盤以及罩子的內外面采樣結束，再用消毒劑輕輕噴射罩子的內壁和轉盤。

（4）采樣口及采樣管，使用前必須高溫滅菌。如用消毒劑對采樣管的外壁及內壁進行消毒時,應將管中的殘留液倒掉并晾干。

（5）采樣者應穿戴與被測潔凈區域相應的工作服，在轉盤上放入或調換培養皿前,雙手用消毒劑消毒或戴無菌手套操作。

（6）采樣儀器經消毒后先不放入培養皿，開啟浮游菌釆樣器，使儀器中的殘余消毒劑蒸發時間不少于5min,并檢查流量并根據采樣量調整設定采樣時間。

（7）關閉浮游菌采樣器，放入培養皿，蓋上蓋子。

（8）置采樣口于采樣點后，開啟浮游菌采樣器進行采樣。

2.培養

（1）全部采樣結束后，將培養皿倒置于恒溫培養箱中培養。

（2）采用大豆酩蛋白瓊脂培養基(TSA)配制的培養皿經采樣后,，在30℃~35℃培養箱中培養，時間不少于2d；采用沙氏培養基(SDA)配制的培養皿經采樣后，在20℃~25℃培養箱中培養，時間不少于5d。

（3）每批培養基應有對照試驗，檢驗培養基本身是否污染。可每批選定3只培養皿作對照培養。

3.菌落計數

（1）用肉眼對培養皿上所有的菌落直接計數、標記或在菌落計數器上點計，然后用5~10倍放大鏡檢查，有否遺漏。

（2）若平板上有2個或2個以上的菌落重疊，可分辨時仍以2個或2個以上菌落計數。

4.注意事項

（1）使用前應仔細檢查每個培養皿的質量，培養基及培養皿有變質、破損或污染的不能使用。

（2）對培養基、培養條件及其他參數作詳細的記錄。

（3）由于細菌種類繁多，差別甚大，計數時一般用透射光于培養皿背面或正面仔細觀察，不要漏計培養皿邊緣生長的菌落，并須注意細菌菌落或培養基沉淀物的區別，必要時用顯微鏡鑒別。

測試條件

在測試之前，要對潔凈室(區)相關參數進行預先測試，這類測試將會提供測試懸浮粒子的環境條件，例如:這種預先測試或可包括:

1.溫度和相對濕度的測試。潔凈室(區)的溫度和相對濕度應與其生產及工藝要求相適應(無特殊要求時，溫度在18℃~26℃，相對濕度在45%~65%為宜)，同時應滿足測試儀器的使用范圍。

2.室內送風量或風速的測試，或壓差的測試。

3.高效過濾器的泄漏測試。

測試狀態

1.靜態和動態兩種狀態均可進行測試。

2.靜態測試時，室內測試人員不得多于2人。

3.浮游菌測試前，被測潔凈室(區)由用戶決定是否需要預先消毒。

4.測試報告中應標明測試時所采用的狀態和室內測試人員數。

測試時間

1.在空態或靜態a測試時，對單向流潔凈室(區)而言，測試宜在凈化空氣調節系統正常運行時間不少于10min后開始。對非單向流潔凈室(區)，測試宜在凈化空氣調節系統正常運行時間不少于30min后開始。在靜態b測試時，對單向流潔凈室(區)，測試宜在生產操作人員撤離現場并經過10min自凈后開始；對非單向流潔凈室(區)，測試宜在生產操作人員撤離現場并經過20min自凈后開始。

2.在動態測試時，則須記錄生產開始的時間以及測試時間。