藥用蜂蜜的檢測(cè)方法

藥用蜂蜜的檢測(cè)方法

【性狀】本品為半透明、帶光澤、濃稠的液體，白色至淡黃色或橘黃色至黃褐色，放久或遇冷漸有白色顆粒狀結(jié)晶析出。氣芳香，味極甜。 相對(duì)密度 本品如有結(jié)晶析出，可置于不超過(guò)60℃的水浴中，待結(jié)晶全部融化后，攪勻，冷至25℃，照相對(duì)密度測(cè)定法（通則0601）項(xiàng)下的韋氏比重秤法測(cè)定，相對(duì)密度應(yīng)在1.349以上。 【檢查】水分 不得過(guò)24.0%（通則0622折光率測(cè)定法進(jìn)行測(cè)定）。 取本品（有結(jié)晶析出的樣品置于不超過(guò)60℃的恒溫水浴中溫?zé)崾谷诨?～2滴，滴于棱鏡上（預(yù)先連接阿貝折光計(jì)與恒溫水浴，并將水浴溫度調(diào)至40℃±0.1℃至恒溫，用新沸過(guò)的冷水校正折光計(jì)的折光指數(shù)為1.3305）測(cè)定，讀取折光指數(shù)，按下式計(jì)算： X=100-[78+390.7（n-1.4768）] X——樣品中的水分含量（％） n——樣品在40℃時(shí)的折光指數(shù) 酸度 取本品10g，加新沸過(guò)的冷水50ml，混勻，加酚酞指示液2滴與*滴定液（0.1mol/L）4ml，應(yīng)顯粉紅色，10秒鐘內(nèi)不消失。 淀粉和糊精 取本品2g，加水10ml，加熱煮沸，放冷，加dian試液1滴，不得顯藍(lán)色、綠色或紅褐色。 寡糖 取本品2g，置燒杯中，加入10ml水溶解后，緩緩加至活性炭固相萃取柱（在固相萃取空柱管底部塞入一個(gè)篩板，壓緊，置固相萃取裝置上。稱取硅藻土0.2g，加水適量混勻，用吸管加至固相萃取柱管中，自然沉降形成3mm厚的硅藻土層，打開(kāi)真空泵吸引，稱取活性炭0.5g加10ml水?dāng)嚢瑁靹颍梦芗尤耄谡婵毡玫奈率够钚蕴砍两担?dāng)水面接近活性炭層面時(shí)，再次注入0.2g用水混勻的硅藻土，在真空泵的吸引下，以1秒/滴的速度用25ml的水預(yù)洗，當(dāng)液面到達(dá)柱面上2mm時(shí)關(guān)掉活塞，再壓入上篩板，備用）中，打開(kāi)活塞，在真空泵的吸引下，使溶液通過(guò)柱子，待液面下降到柱面以上2mm時(shí)，用7%乙醇25ml洗脫，棄去洗脫液。再用50%乙醇10ml洗脫，收集洗脫液，置65℃水浴中減壓濃縮至干，殘?jiān)?0%乙醇1ml使溶解，作為供試品溶液。另取麥芽五糖對(duì)照品，加30%乙醇制成每1ml含1mg的溶液，作為對(duì)照品溶液。照薄層色譜法（通則0512）試驗(yàn)，吸取供試品溶液與對(duì)照品溶液各3μl，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以正丙醇-水-三乙胺（60：30：0.7）為展開(kāi)劑，展開(kāi)，取出，晾干，噴以苯胺-二苯胺-磷酸的混合溶液（取二苯胺1g，苯胺1ml，磷酸5ml，加丙醇^[1]至50ml，混勻），加熱至斑點(diǎn)顯色清晰，在日光下檢視。供試品色譜中，在與對(duì)照品相應(yīng)位置的下方，應(yīng)不得顯斑點(diǎn)。 5-羥甲基糠醛 照液相色譜法（通則0512）測(cè)定。 色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn) 以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以乙腈-0.1%甲酸溶液（5：95）為流動(dòng)相；5-羥甲基糠醛檢測(cè)波長(zhǎng)為284nm，鳥苷檢測(cè)波長(zhǎng)為254nm。理論板數(shù)按鳥苷峰計(jì)算應(yīng)不低于3000。 對(duì)照品溶液的制備 取鳥苷對(duì)照品適量，精密稱定，加10%甲醇制成每1ml含鳥苷0.2mg的溶液，即得。另取5-羥甲基糠醛對(duì)照品適量，加10%甲醇制成每1ml含4μg的溶液，作為定位用。 供試品溶液的制備 取本品1g，置燒杯中，精密稱定，加10%甲醇適量溶解，并分次轉(zhuǎn)移至50ml量瓶中，精密加入鳥苷對(duì)照品溶液1ml，加10%甲醇至刻度，搖勻，即得。 測(cè)定法精密吸取供試品溶液10μl，注入液相色譜儀，測(cè)定；另取鳥苷對(duì)照品溶液，5-羥甲基糠醛對(duì)照品溶液各10μl，注入液相色譜儀，測(cè)定，用以確定供試品色譜中5-羥甲基糠醛及鳥苷的色譜峰；以鳥苷對(duì)照品計(jì)算含量并乘以校正因子0.340進(jìn)行校正，即得。 本品含5-羥甲基糠醛，不得過(guò)0.004%。 蔗糖和麥芽糖照〔含量測(cè)定〕項(xiàng)下方法測(cè)定，分別計(jì)算含量。本品含蔗糖和麥芽糖分別不得過(guò)5.0%。 【含量測(cè)定】照液相色譜法（通則0512）測(cè)定。 色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn) 以Prevail Carbohyrate ES為色譜柱，以乙腈-水（75：25）為流動(dòng)相；示差折光檢測(cè)器檢測(cè)。理論板數(shù)按果糖峰計(jì)算應(yīng)不低于2000。 標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備 分別精密稱取果糖對(duì)照品1.0g，葡萄糖對(duì)照品0.8g，置同一具塞錐形瓶中，精密加入40%乙腈20ml，溶解，搖勻，作為果糖、葡萄糖對(duì)照品儲(chǔ)備液。另精密稱取蔗糖對(duì)照品0.2g，麥芽糖對(duì)照品0.2g，置同一具塞錐形瓶中，精密加入40%乙腈10ml，溶解，搖勻，作為蔗糖、麥芽糖對(duì)照品儲(chǔ)備液。分別精密量取果糖、葡萄糖對(duì)照品儲(chǔ)備液和蔗糖、麥芽糖對(duì)照品儲(chǔ)備液，加40%乙腈配成不同濃度的果糖、葡萄糖、蔗糖、麥芽糖混合對(duì)照品溶液。每一濃度溶液配制中，儲(chǔ)備液的用量和稀釋體積見(jiàn)下表。 序號(hào) 果糖、葡萄糖 蔗糖、麥芽糖 稀釋體積 混合對(duì)照品溶液濃度（mg/ml） 對(duì)照品儲(chǔ)備液體積（ml） 對(duì)照品儲(chǔ)備液體積（ml） （ml） 果糖 葡萄糖 蔗糖 麥芽糖 1 1.0 0.125 5 10 8 0.5 0.5 2 3.0 0.5 10 15 12 1.0 1.0 3 2.0 0.5 5 20 16 2.0 2.0 4 5.0 2.0 10 25 20 4.0 4.0 5 3.0 1.5 5 30 24 6.0 6.0 精密吸取混合對(duì)照品溶液各15μl，注入液相色譜儀，分別測(cè)定。以對(duì)照品濃度為橫坐標(biāo)，以峰面積值為縱坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，計(jì)算回歸方程。 供試品溶液的制備 取本品約1g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入40%乙腈20ml，溶解，搖勻，濾過(guò)，取續(xù)濾液，即得。 測(cè)定法 精密量取供試品溶液15μl，注入液相色譜儀，測(cè)定，按標(biāo)準(zhǔn)曲線法計(jì)算含量。 本品含果糖（C₆H₁₂O₆）和葡萄糖（C₆H₁₂O₆）的總量不得少于60.0%，果糖與葡萄糖含量比值不得小于1.0。