sh-sy5y人神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞
名稱 | SH-SY5Y [SHSY-5Y] (人神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞) (STR鑒定正確) |
別稱 | SHSY5Y; SHSY-5Y; SH-Sy5y; SK-SH-SY5Y; SY5Y |
種屬 | 人類 |
年齡（性別） | 女性，4歲 |
組織來源 | 腦神經(jīng)母細(xì)胞瘤，轉(zhuǎn)移部位骨髓 |
生長特性 | 半貼半懸 |
細(xì)胞形態(tài) | 上皮細(xì)胞樣 |
背景描述 | SH-SY5Y細(xì)胞是于1970年建自骨瘤轉(zhuǎn)移灶的神經(jīng)母細(xì)胞瘤SK-N-SH細(xì)胞系經(jīng)3次克隆后的亞系(SK-N-SH→SH-SY→SH-SY5→SH-SY5Y)。SH-SY5Y細(xì)胞顯示中等水平的多巴胺-β-羥基酶活性，SH-SY5Y細(xì)胞的飽和密度大于1×10^6/cm^2。 |
生物安全等級 | 1 |
生長培養(yǎng)基 | MEM/F12＋15% FBS＋1% P/S |
推薦傳代比例 | 1:3-1:4 |
推薦換液頻率 | 2~3次/周 |
倍增時間 | ~48-72小時 |
凍存條件 | 凍存液：55% 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40?S+5%DMSO 溫度：液氮 |
培養(yǎng)條件 | 氣相：空氣，95%；CO2，5% 溫度：37℃ |
抗原表達(dá)情況 | Blood Type A; Rh+ |
保藏機(jī)構(gòu) | ATCC; CRL-2266 DSMZ; ACC-209 ECACC; 94030304 |
二、細(xì)胞培養(yǎng)操作
1) 復(fù)蘇細(xì)胞：以下細(xì)胞培養(yǎng)凍存處理僅供參考，具體操作步驟以隨貨產(chǎn)品說明書為主。將含有1 mL細(xì)胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍，加4 mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000 rpm條件下離心3 min，棄去上清液，加1-2 mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入含適量培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10 cm皿中，加入約8 mL培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2) 細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá) 80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
a、棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。
b、加1 mL消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，使消化液浸潤所有細(xì)胞，將培養(yǎng)瓶置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2 min（視細(xì)胞情況而定），然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加2-3ml培養(yǎng)基終止消化。輕輕打勻后裝入無菌離心管中，1000 rpm離心5 min，棄去上清液，補(bǔ)加1-2 mL培養(yǎng)液后吹勻。
c、將細(xì)胞懸液按1:2比例分到新的含8 mL培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中，置于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
3) 細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面 T25 瓶為例；
a、收集細(xì)胞及細(xì)胞培養(yǎng)液，裝入無菌離心管中，1000 rpm條件下離心4 min，棄去上清液，用PBS清洗一遍，棄盡PBS，進(jìn)行細(xì)胞計數(shù)。
b、根據(jù)細(xì)胞數(shù)量加入無血清細(xì)胞凍存液，使細(xì)胞密度5×106~1×107/mL，輕輕混勻，每支凍存管凍存1mL細(xì)胞懸液，注意凍存管做好標(biāo)識。將凍存管放入-80℃冰箱，24 h后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
三、培養(yǎng)注意事項(xiàng)
1. 收到細(xì)胞后首先觀察細(xì)胞瓶是否完好，培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象，若有上述現(xiàn)象 發(fā)生請及時和我們聯(lián)系。
2. 仔細(xì)閱讀細(xì)胞說明書，了解細(xì)胞相關(guān)信息，如細(xì)胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、所需 細(xì)胞因子等，確保細(xì)胞培養(yǎng)條件一致，若由于培養(yǎng)條件不一致而導(dǎo)致細(xì)胞出現(xiàn)問題，責(zé)任由 客戶自行承擔(dān)。
3. 用 75%酒精擦拭細(xì)胞瓶表面，顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。因運(yùn)輸問題，部分細(xì)胞由于溫度 變化及劇烈碰亡破碎形成碎片，是正?，F(xiàn)象。觀察好細(xì)胞狀態(tài)后，75%酒精消毒瓶壁將 T25 瓶置于 37℃培養(yǎng)箱放置 2-4h。
4. 貼壁細(xì)胞可以消化，懸浮細(xì)胞直接混勻收集細(xì)胞，900 rpm-1000 rpm 離心 3 min，棄上 清。加 5 mL PBS 重懸細(xì)胞，再 900 rpm-1000 rpm 離心 3 min，用新鮮的培養(yǎng)基重懸 細(xì)胞，并接種到新的培養(yǎng)瓶或培養(yǎng)皿中，置于培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)。
5. 請客戶用相同條件的培養(yǎng)基用于細(xì)胞培養(yǎng)。
6. 建議客戶收到細(xì)胞后前 3 天各拍幾張細(xì)胞照片，記錄細(xì)胞狀態(tài)，便于和我司技術(shù)部溝通 交流。由于運(yùn)輸?shù)脑?，個別敏感細(xì)胞會出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況，請及時和我們聯(lián)系，告知細(xì)胞 的具體情況，以便我們的技術(shù)人員跟蹤回訪直至問題解決。
7. 該細(xì)胞僅供科研使用。
8. 備注：運(yùn)輸用的培養(yǎng)基 (灌液培養(yǎng)基) 不能再用來培養(yǎng)細(xì)胞，請換用按照說明書細(xì)胞培 養(yǎng)條件新配制的培養(yǎng)基來培養(yǎng)細(xì)胞。 收到細(xì)胞后第一次傳代建議 1：2 傳代。
9. 注意： 1:2 傳代就是 1 個 T25 瓶傳 2 個 T25 瓶或者 2 個 6cm 皿。不是 1 個 T25 瓶傳 2 個10cm 皿。
公司正在出售的產(chǎn)品：
sEPCR ELISA Kit | 禽傳染性支氣管炎病毒Ark型RT-PCR試劑盒 |
Tumor Associated Glycoprotein 72(TAG72)ELISA Kit | 艾利希體屬（埃立克體屬）通用PCR試劑盒 |
ALB ELISA Kit | 松鼠猴皰疹病毒PCR檢測試劑盒 |
TRAIL-R4 ELISA Kit | 嚙蝕艾肯菌PCR檢測試劑盒 |
gp130 ELISA Kit | 粗球孢子菌PCR試劑盒 |
alveoli baseme membrane zone aibody,ABM-Ab ELISA Kit | 鴨腸炎病毒PCR試劑盒 |
MCP-2/CCL8 ELISA Kit | 乙型肝炎病毒米夫定耐藥PCR檢測試劑盒 |
Ultra Sensitive growth hormone,U S-GH ELISA Kit | 純綠青霉PCR檢測試劑盒 |
Aminoadipate Aminotransferase(AADAT)ELISA Kit | 大腸埃希菌(大腸O)stx(bp)和stx(bp)常規(guī)PCR檢測試劑盒 |
Tumor Necrosis Factor Receptor Superfamily, Member 1B(TNFRSF1B)ELISA Kit | 乙型肝炎病毒E型PCR試劑盒 |
MMP-13 ELISA Kit | MHC-Ⅱ/H-2ⅡELISA試劑盒 |
tuberculosis aibody IgG，TB-Ab IgG ELISA Kit | ADV-IgM 人腺病毒IgMELISA檢測試劑盒 |
Tumor Necrosis Factor Ligand Superfamily, Member 14(TNFSF14)ELISA Kit | sh-sy5y人神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞張力蛋白3(TNS3)ELISA試劑盒 |
Amebiasis ELISA Kit | aFGF-1 人suan性成纖維細(xì)胞生長因子1ELISA檢測試劑盒 |
Alanine Aminopeptidase(AAP)ELISA Kit | Agrin 人聚集蛋白ELISA檢測試劑盒 |
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