【參數信息】
英文名稱:XL1-Blue Electrocompetent cell 大腸桿菌電轉感受態細胞
中文名稱:XL1-Blue 電擊感受態細胞
熱穩定性:不可熱激轉化;操作時需嚴格控溫(冰浴)
機械敏感性:避免劇烈震蕩、氣泡產生,輕柔操作以防細胞膜損傷
使用限制:DNA加入量≤1/10體積;適用電擊轉化
純度:≥95%
儲存條件:-20℃避光干燥
生產廠商:西安強化生物科技
【簡單概述】
XL1-Blue Electrocompetent cell 電轉感受態細胞是一種通過特殊工藝處理大腸桿菌XL1-Blue菌株得到的工程化細胞, 用于電擊轉化,不適用于熱激轉化。
其核心特性包括:
高轉化效率:經pUC19質粒檢測,適用于文庫構建等高效克隆需求 。
基因型優勢:
recA1 和 endA1 突變:減少DNA重組并消除核酸內切酶活性,提高插入片段穩定性和質粒DNA純度 。
hsdR17 突變:使EcoK限制系統失活,保護外源DNA不被切割 。
lacIqZΔM15 基因:支持藍白斑篩選,便于重組質粒鑒定 。
四環素抗性:由F′附加體上的 Tn10 基因提供,用于篩選轉化子 。
適用范圍:僅用于電擊轉化。
【注意事項】
1) 感受態細胞保存在-80℃以下,不可反復凍融和放置時間過長,以免降低感受態細胞的轉化效率。
2) 整個轉化操作,嚴格根據相應溫度及無菌條件要求進行。
3) 加入DNA的體積不應大于感受態體積的1/10。DNA不純或存在鹽、乙醇、蛋白及緩沖液等污染時,會導致轉化效率急劇下降。
4) 為確保轉化效率,整個操作過程應盡量輕柔,并保持低溫。
5) 電擊感受態細胞加入電擊杯應避免產生氣泡,氣泡會增加弧光放電風險。
6) 電擊杯里的離子可增加溶液的電導,增大在含有細胞和DNA的溶液中產生電流和弧光放電的風險。
7) 若轉化大質粒或想獲得較高轉化效率,推薦使用高純質粒提取試劑盒提取質粒。質粒增大一倍,轉化效率下降一個數量級。
8) 對于連接產物轉化:在轉化前乙醇沉淀DNA后用適量TE緩沖液重懸產物,保證DNA濃度不超過100ng/μl。過高濃度連接產物或過大體積連接產物會降低轉化效率,增加弧光放電的風險。
9) 混入質粒時應輕柔操作,吸取感受態細胞時不可用孔徑過小的槍頭(普通200μl槍頭應剪去槍頭尖0.6cm)。避免用力過猛,以免剪切力過大損傷細胞膜,降低轉化效率。轉化高濃度的質粒或連接產物可相應減少最終用于涂板的菌量。
10) 為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。
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本試劑僅適用于科研實驗,敬請知悉。












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