利用斑馬魚模型評價胃腸道粘膜損傷輔助保護功效
【評價原理】
近年來，各種各樣的美食迫使人們越來越關注胃腸道健康問題。斑馬魚的基因與人類基因的相似度達到87％，并擁有與人類結構和功能相似的胃腸道組織。斑馬魚胃腸道粘膜屏障系統由較完整的機械屏障、化學屏障和免疫屏障構成，與哺乳動物高度相似，可作為胃腸道粘膜屏障研究的動物模型。*磺酸（TNBS）可破壞胃腸粘膜屏障，與腸組織蛋白結合形成抗原，發生變tai反應，誘發潰瘍性胃腸道損傷。胃腸道病變累及肌層和神經，導致胃腸壁張力減退，胃腸腔擴大。胃腸道病變時出現炎癥反應，中性粒細胞募集到損傷部位。杯狀細胞主要分泌黏蛋白，形成黏膜屏障以保護上皮細胞，胃腸黏膜損傷時杯狀細胞數量減少。通過病理切片可觀察胃腸道組織學改變（如潰瘍形成等）的情況。
我們評價斑馬魚胃腸道粘膜損傷輔助保護功效有4個指標：1. 觀察胃腸腔面積；2. 應用轉基因中性粒細胞綠色熒光斑馬魚，觀察胃腸道中性粒細胞數量；3. 應用特異性的染料（呈藍色），觀察腸道杯狀細胞數目；4. 胃腸道病理切片。
【實驗方案】利用斑馬魚模型評價胃腸道粘膜損傷輔助保護功效
我們將受測試斑馬魚分成三組，分別是正常對照組、模型對照組和服用胃腸道粘膜輔助保護劑組。其中正常對照組未經任何處理，模型對照組與服用胃腸道粘膜輔助保護劑組都攝入了等量的TNBS（TNBS通過溶解到養魚用水中的方式攝入到斑馬魚體內）。服用胃腸道粘膜輔助保護劑組在TNBS誘導胃腸道粘膜損傷之后攝入常欣衛口服液之類的胃腸道粘膜輔助保護劑。
服用一段時間胃腸道粘膜輔助保護劑后，我們觀察斑馬魚胃腸道表型，分析胃腸腔面積，胃腸道中性粒細胞數目和杯狀細胞數目，同時制作成病理切片觀察胃腸道的病理結構變化。
【結果展示】
圖1. 斑馬魚胃腸道表型圖（藍色虛線區域為胃腸腔）
可以看到，服用胃腸道粘膜輔助保護組的胃腸腔面積與正常對照組比較相似，沒有明顯的胃腸腔擴張。
圖2. 斑馬魚胃腸道中性粒細胞表型圖（黃色虛線區域為腸腔）
可以看到，服用胃腸道粘膜輔助保護劑組的腸道中性粒細胞數量與正常對照組比較相似，沒有明顯的增多。
圖3. 斑馬魚胃腸道杯狀細胞表型圖
可以看到，服用胃腸道粘膜輔助保護劑組的腸道杯狀細胞數量與正常對照組比較相似，沒有明顯的減少。
圖4. 斑馬魚胃腸道病理切片
可以看到，服用胃腸道粘膜輔助保護劑組的胃腸粘膜形態與正常對照組比較相似，沒有明顯的胃腸腔擴張、粘膜糜爛潰瘍等癥狀。
【評價結論】
1. 經過每組30尾斑馬魚的對比實驗，服用胃腸道粘膜輔助保護劑組的胃腸腔情況與正常對照組相似，并未出現模型對照組胃腸腔擴張、中性粒細胞數量增加、腸道杯狀細胞數目減少、粘膜糜爛潰瘍等情況。
2. 本實驗證實了常欣衛口服液具有明顯胃腸道粘膜輔助保護功效。
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